免疫組織化学とは、抗体を用いて顕微鏡下で組織中の特定のタンパク質や分子を検出する技術です。科学者や病理学者が特定の細胞や組織を同定し、病気のメカニズムを調べることを可能にします。組織切片は、抗体で簡単に染色できる薄くて平らなサンプルを提供するため、免疫組織化学に必要です。組織切片がなければ、複雑なサンプル中の異なる細胞や組織を区別することは困難となり、特定の生物学的プロセスを研究し、疾患に関連するバイオマーカーを同定することが難しくなります。
Compresstome®ビブラトームの利点
-
優れた形態：組織の安定化により、組織の構造的完全性が保たれます。
-
滑らかな切片：組織安定化＝アーチファクトなし
-
高速：圧縮による組織の安定化により、切片作製が格段に速くなります。
-
メンテナンスが簡単：オートZero-Zは、キャリブレーション不要のZero-Zを意味します。
-
使いさすさ：多くの研究室ではCompresstomeによって1回目または2回目で多くの生細胞を含む非常に滑らかなスライスを得ることができます。
従来の振動ミクロトームの問題点
-
形態の変化：組織の断裂、折れ曲がり、破砕により、組織に歪みが生じる。
-
スライス厚のばらつき：不均一な厚みはタンパク質の可視化に影響を与える。
-
切断アーチファクト：タンパク質染色に影響を与える明らかな切断アーチファクト。
-
メンテナンスとキャリブレーション：専門的な知識を必要とし、メンテナンスに時間がかかる。
-
習得の難しさ：特にIHCや組織前処理に慣れていないユーザーにとっては、完璧な結果を得るには多くの練習が必要。
Compresstome® 振動ミクロトーム
実験の質は、組織切片の質に左右されます。Compresstome® 振動式ミクロトームは、他の振動式ミクロトームと 比較して、免疫組織化学用の薄切片をより安定的に、より信頼性高く作製できる ことが科学的に証明されています。
Compresstome® の振動ミクロトームは、以下のような方法で、ビビリ痕のない安定した厚さの組織切片を作成します。
-
360度のアガロース包埋により、切断プロセス中に脳組織を安定化させる。
-
高速スライスを可能にすることで、連続切片作製の時間を短縮します。
-
高周波振動メカニズムにより、ビビリマークを低減または除去。
-
特許取得のAuto Zero-Z®テクノロジーにより、カッティングブレードのZ軸方向のたわみをなくすことで、ビビリマークを低減。
Compresstome® 振動式ミクロトームと他社製振動式ミクロトームで切断した組織切片の比較画像
Compresstome® 振動式ミクロトームと他社製振動式ミクロトームの切片の比較（A, C）。他社製ビブラトームで同じ切削速度と振動で組織スライスを作製した場合、組織スライスの表面にビビリマークが発生している。
免疫組織化学 - 推奨モデル
VF-510-0Z
振動ミクロトームCompresstome® VF-510-0Zは特許取得済みの圧縮技術によりビビリ・チャタリングなしで切片を作製し、急性組織上の多くの生存細胞を維持。良質な実験結果を保証します。
-
従来のビブラトームの5倍の速さで切開し、ブレードを組織に当てる時間を短縮し、より良い切開を実現
-
Auto Zero-Zテクノロジーにより、Z軸のたわみを1 µm未満に低減
-
持ち運びに便利な軽量設計
-
完全自動化：切開＋厚み調整
研究室での実例
実験デザインにおける動物組織の "3D "利用
一つのマウスの脳をどのように複数の実験に使うことができるのか、不思議に思ったことはありませんか？組織サンプルがさらに進化するように、動物組織をマルチユースの研究実験に使用する戦略を発見してみませんか？ハーバード大学医学部およびマサチューセッツ総合病院のYiying Zhang博士がウェビナーのゲストスピーカーです。このPrecisionaryウェビナーでは、Zhang博士が学術研究における実験計画の立案における動物組織の「3D」利用について説明します。
免疫療法研究におけるCompresstome®の使用
Astero Klampatsa博士（PhD）は、英国ロンドンがん研究所がん免疫療法のチームリーダーであり、英国キングス・カレッジ・ロンドンの上級講師です。中皮腫と肺癌に対する新規CAR T細胞療法の開発、および免疫療法に対する反応マーカーを同定するためのこれらの悪性腫瘍の免疫生物学に焦点を当てています。このウェビナーでは、Klampatsa博士が、Compresstome®を用いて、免疫療法研究のための生体外モデルとしてプレシジョンカット腫瘍スライス（PCTS）をどのように作成したかについて説明しています。
生体外アッセイサービスのための精密切断組織スライスの作成
Visikol社は、高度なイメージング、3D細胞培養アッセイ、デジタルパソロジーを活用し、創薬・開発プロセスを加速させることに特化した受託研究サービス企業です。このウェビナーでは、Visikol社が、肝臓損傷を研究するためのin vitro肝臓モデルの必要性について説明します。精密切断肝切片（PCLS）を作製するための標準的なアッセイフォーマットを実演し、Compresstome® VF-310-0Z振動ミクロトームが、治療間で意味のある比較ができる均一な組織スライスを作製するのに役立つことを説明します。PCLSを作成するためのCompresstome®の使い方を順を追って説明します。
親油性染料、in situ ハイブリダイゼーション、免疫組織化学、組織学
Compresstome® 振動ミクロトームを使用して、親油性染料のトレース、ホールマウント in situ ハイブリダイゼーション、免疫組織化学、組織学を組み合わせた組織スライスを作成し、可能な限り最大限のデータを抽出する方法をご覧ください。
組織中の抗原特異的CD8 T細胞のin situ MHC-tetramer染色と定量分析
新鮮な組織は、組織の種類や動物の成熟度（有髄化）などの様々な要因によって、切断の難易度が大きく異なります。他の振動型ミクロトームでは、高度に有髄化した組織や非常に柔らかい新生児組織を扱うのに苦労することがよくあります。圧縮効果に加え、複数の調整ポイント（速度、振動、アガロース濃度）により、「切断が困難な」組織をよりうまく扱うことができます。Compresstome®は、単に他社製品より薄く切断できるだけでなく、細胞表面構造を保持し、死滅細胞数に対して健全細胞数を増加させる、より質の高い切断が可能であることを示す証拠であると確信しています。ミネソタ大学の研究者たちは、抗原特異的CD8 T細胞の位置を特定し、定量し、表現型を決定するために、Compresstome® を用いて生きた組織を切開しています。
腫瘍のスライス：肺腫瘍スライス培養の試みからの考察
Tsilingiri博士は腫瘍免疫療法に取り組んでおり、Compresstome振動ミクロトームを使って、スライス培養における腫瘍組織と自己リンパ節細胞との相互作用を調べています。この研究は、EUが資金提供するコンソーシアムTumour-LNoC（Tumour-Lymph node on a chip）の枠組みの中で行われており、最終的な目標は、チップ上で転移プロセスを模倣し、転移細胞をリアルタイムでモニターすることです。
Compresstome®を用い二次元から三次元の病理組織学へ
Wong博士は、脳のような臓器全体の高速組織学的3Dイメージングのために、カスタムメイドのCompresstome®をどのように製作したかを紹介しています。
論文
Chen X, Wolfe DA, Bindu DS, Zhang M, Taskin N, Goertsen D, Shay TF, Sullivan EE, Huang SF, Ravindra Kumar S, Arokiaraj CM, Plattner VM, Campos LJ, Mich JK, Monet D, Ngo V, Ding X, Omstead V, Weed N, Bishaw Y, Gore BB, Lein ES, Akrami A, Miller C, Levi BP, Keller A, Ting JT, Fox AS, Eroglu C, Gradinaru V. Functional gene delivery to and across brain vasculature of systemic AAVs with endothelial-specific tropism in rodents and broad tropism in primates. Nat Commun. 2023 Jun 8;14(1):3345. PMID: 37291094; PMCID: PMC10250345. PDFダウンロード
Mastorakos P, Mihelson N, Luby M, Burks SR, Johnson K, Hsia AW, Witko J, Frank JA, Latour L, McGavern DB. Temporally distinct myeloid cell responses mediate damage and repair after cerebrovascular injury. Nat Neurosci. 2021 Feb;24(2):245-258. Epub 2021 Jan 18. PMID: 33462481; PMCID: PMC7854523. PDFダウンロード
Rindner DJ, Proddutur A, Lur G. Cell-type-specific integration of feedforward and feedback synaptic inputs in the posterior parietal cortex. Neuron. 2022 Nov 16;110(22):3760-3773.e5. Epub 2022 Sep 9. PMID: 36087582; PMCID: PMC9671855. PDFダウンロード
