in-situ ハイブリダイゼーションは、核酸プローブを用いて細胞や組織内の特定のDNAやRNA配列を検出する技術です。遺伝学や分子生物学の研究において重要なツールであり、遺伝子の発現パターンを調べたり、突然変異や遺伝子異常を同定したりすることができます。組織切片は、核酸プローブと容易にハイブリダイズできる薄くて平坦なサンプルを提供するため、in-situハイブリダイゼーションに必要不可欠です。組織切片がなければ、複雑なサンプル中の特定の細胞や組織を同定して位置を特定することは困難で、遺伝子発現パターンや遺伝子異常の研究を困難にします。
Compresstome®ビブラトームの利点
-
優れた形態：組織の安定化により、組織の構造的完全性が保たれます。
-
滑らかな切片：組織安定化＝アーチファクトなし
-
高速：圧縮による組織の安定化により、切片作製が格段に速くなります。
-
メンテナンスが簡単：オートZero-Zは、キャリブレーション不要のZero-Zを意味します。
-
使いさすさ：多くの研究室ではCompresstomeによって1回目または2回目で多くの生細胞を含む非常に滑らかなスライスを得ることができます。
従来の振動ミクロトームの問題点
-
形態の変化：組織の断裂、折れ曲がり、破砕により、組織に歪みが生じる。
-
スライス厚のばらつき：不均一な厚みはタンパク質の可視化に影響を与える。
-
切断アーチファクト：タンパク質染色に影響を与える明らかな切断アーチファクト。
-
メンテナンスとキャリブレーション：専門的な知識を必要とし、メンテナンスに時間がかかる。
-
習得の難しさ：特にIHCや組織前処理に慣れていないユーザーにとっては、完璧な結果を得るには多くの練習が必要。
Compresstome® 振動ミクロトーム
実験の質は、組織切片の質に左右されます。Compresstome® 振動式ミクロトームは、他の振動式ミクロトームと 比較して、免疫組織化学用の薄切片をより安定的に、より信頼性高く作製できる ことが科学的に証明されています。
Compresstome® の振動ミクロトームは、以下のような方法で、ビビリ痕のない安定した厚さの組織切片を作成します。
-
360度のアガロース包埋により、切断プロセス中に脳組織を安定化させる。
-
高速スライスを可能にすることで、連続切片作製の時間を短縮します。
-
高周波振動メカニズムにより、ビビリマークを低減または除去。
-
特許取得のAuto Zero-Z®テクノロジーにより、カッティングブレードのZ軸方向のたわみをなくすことで、ビビリマークを低減。
Compresstome® 振動式ミクロトームと他社製振動式ミクロトームで切断した組織切片の比較画像
Compresstome® 振動式ミクロトームと他社製振動式ミクロトームの切片の比較（A, C）。他社製ビブラトームで同じ切削速度と振動で組織スライスを作製した場合、組織スライスの表面にビビリマークが発生している。
in-situ ハイブリダイゼーション - 推奨モデル
VF-510-0Z
振動ミクロトームCompresstome® VF-510-0Zは特許取得済みの圧縮技術によりビビリ・チャタリングなしで切片を作製し、急性組織上の多くの生存細胞を維持。良質な実験結果を保証します。
-
従来のビブラトームの5倍の速さで切開し、ブレードを組織に当てる時間を短縮し、より良い切開を実現
-
Auto Zero-Zテクノロジーにより、Z軸のたわみを1 µm未満に低減
-
持ち運びに便利な軽量設計
-
完全自動化：切開＋厚み調整
研究室での実例
子宮内エレクトロポレーションによるマウス発育視床下部の遺伝子操作
研究者らは、DNAを注入しエレクトロポレーションしたマウス胚視床下部を切片化する手順でCompresstome®を使用しました。この方法は、表層部よりもアクセスしにくい視床下部領域の核へのトランスフェクションがいかに可能であるかを示しています。この手順の後、免 疫組織化学やin situハイブリダイゼーションなどの追加実験を行うことができます。
親油性染料、in situ ハイブリダイゼーション、免疫組織化学、組織学
Compresstome® 振動ミクロトームを使用して、親油性染料のトレース、ホールマウント in situ ハイブリダイゼーション、免疫組織化学、組織学を組み合わせた組織スライスを作成し、可能な限り最大限のデータを抽出する方法をご覧ください。
論文
Chen X, Wolfe DA, Bindu DS, Zhang M, Taskin N, Goertsen D, Shay TF, Sullivan EE, Huang SF, Ravindra Kumar S, Arokiaraj CM, Plattner VM, Campos LJ, Mich JK, Monet D, Ngo V, Ding X, Omstead V, Weed N, Bishaw Y, Gore BB, Lein ES, Akrami A, Miller C, Levi BP, Keller A, Ting JT, Fox AS, Eroglu C, Gradinaru V. Functional gene delivery to and across brain vasculature of systemic AAVs with endothelial-specific tropism in rodents and broad tropism in primates. Nat Commun. 2023 Jun 8;14(1):3345. PMID: 37291094; PMCID: PMC10250345. PDFダウンロード
Mastorakos P, Mihelson N, Luby M, Burks SR, Johnson K, Hsia AW, Witko J, Frank JA, Latour L, McGavern DB. Temporally distinct myeloid cell responses mediate damage and repair after cerebrovascular injury. Nat Neurosci. 2021 Feb;24(2):245-258. Epub 2021 Jan 18. PMID: 33462481; PMCID: PMC7854523. PDFダウンロード
Rindner DJ, Proddutur A, Lur G. Cell-type-specific integration of feedforward and feedback synaptic inputs in the posterior parietal cortex. Neuron. 2022 Nov 16;110(22):3760-3773.e5. Epub 2022 Sep 9. PMID: 36087582; PMCID: PMC9671855. PDFダウンロード
関連製品
flexiVent
肺機能測定・解析
flexiVent肺機能測定・解析ソリューションは、in vivo呼吸力学測定のゴールドスタンダードとして広く知られています。従来の肺換気の抵抗とコンプライアンス力学を超え、中枢気道、末端気道、実質の力学的特性に関する重要な詳細を測定・解析します。
flexiVentは実験条件を精密にコントロールすることで、最高の感度と再現性を実現しています。
オレンジサイエンスはemka TECHNOLOGIESの日本総代理店であり、日本国内においてemka TECHNOLOGIES社との唯一の取引窓口です。
vivoFlow
呼吸機能解析
vivoFlowは無拘束での呼吸機能解析装置です。全身、ヘッドアウト、ダブルチャンバーでの呼吸機能解析を提供します。
プレチスモグラフィは、意識のある自発呼吸の実験室被験者の肺機能を研究するための標準的な方法です。気圧脈波法では、被験者が呼吸している間、薬物やその他の刺激にさらされる前後に生じる流量と圧力の変化を測定します。さまざまな被験者のサイズやタイプに容易に適応でき、被験者を連続した実験日に何時間も研究する縦断的研究によく使用されます。
