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骨細胞の刺激培養と静水圧刺激

骨細胞の刺激培養

骨細胞を体内環境に近づけて培養する方法として、力学的刺激、化学的刺激、3D培養システム、および電気的刺激が挙げられます。力学的刺激では、伸縮システムや流体せん断応力を利用し、骨細胞に物理的な応力を与えます。化学的刺激では、TGF-βやBMPsなどの成長因子を添加して骨細胞の増殖や分化を促進します。3D培養システムでは、コラーゲンなどのハイドロゲルやバイオリアクターを用いて、骨組織に近い環境を再現します。また、電気的刺激は骨形成の促進に効果があり、低電圧の電気刺激が用いられることもあります。これらの方法を組み合わせることで、体内に近い環境で骨細胞の培養が可能となり、骨再生や研究に役立ちます。

骨の細胞に静水圧刺激を与えながら培養する方法

骨の細胞に静水圧刺激を与えながら培養するためには、専用の静水圧装置やバイオリアクターが使用されます。静水圧装置は培養チャンバー内で一定の圧力を調整し、骨細胞に静水圧をかけることが可能です。バイオリアクターは静水圧だけでなく、温度やpH、酸素濃度など他の環境条件も制御でき、長期間の培養に適しています。また、カスタム圧力チャンバーも利用されることがあり、静水圧と他の環境因子を細かく調整できる点が特徴です。これらの機器を活用することで、骨細胞の体内に近い環境下での培養が可能となり、細胞の応答や骨形成の研究に大いに貢献します。

骨の細胞培養に静水圧刺激が必要な理由

静水圧刺激は、骨の細胞培養において重要な役割を果たします。以下に、その理由を説明します。

生体内環境の再現

  • 骨や軟骨は、体内で常に機械的な刺激にさらされており、静水圧もその一部です。静水圧刺激は、関節や骨に自然に加わる圧力の一環であり、これを細胞培養で再現することで、細胞の挙動や応答を生体内に近づけることができます。

細胞の分化や機能の促進

  • 静水圧刺激は、骨芽細胞の分化や成熟、マトリックスの生成を促進することが示されています。これにより、骨形成が活発になり、骨再生の研究において重要な因子となります。

細胞のストレス応答の評価

  • 静水圧刺激を加えることで、骨細胞のストレス応答や適応メカニズムを評価できます。これにより、骨関連疾患の治療法の開発に役立つデータを取得できます。

これらの理由から、静水圧刺激は骨の細胞培養において、生理的条件を再現し、細胞の機能や特性を深く理解するために必要とされています。

骨の細胞研究のアプリケーション例

骨の細胞研究は、さまざまな分野で重要な役割を果たしており、以下のようなアプリケーション例があります。

骨再生医療と組織工学

  • 骨折や骨欠損の治療のために、骨細胞の培養を利用して新しい骨組織を作り出す技術の開発に応用されています。培養した骨細胞を移植することで、骨の再生を促すことが期待されます。

骨粗鬆症の研究

  • 骨粗鬆症は骨の密度が低下する疾患で、骨折のリスクが増加します。骨芽細胞や破骨細胞の機能を調べることで、骨代謝のメカニズムを解明し、新しい治療薬の開発に役立ちます。

人工関節やインプラントの評価

  • インプラントの材料や表面処理が骨細胞に及ぼす影響を評価することで、より良い生体適合性を持つ人工関節やインプラントの開発に貢献します。

骨癌の研究

  • 骨癌の細胞挙動や転移のメカニズムを理解するために、骨細胞やがん細胞の相互作用を研究し、がん治療法の開発に応用されています。

薬剤評価と毒性試験

  • 新規治療薬や骨に作用する薬剤の効果と安全性を検証するため、骨細胞を使った培養系での試験が行われています。これにより、より効果的で副作用の少ない薬の開発が可能になります。

これらのアプリケーションは、骨の健康維持や疾患治療、再生医療など、多岐にわたる分野での進展に大きく寄与しています。

静水圧培養システム

静水圧培養システムは、細胞や組織に静水圧を加えながら培養する装置で、体内の物理的環境を再現するために使用されます。システム全体としては、圧力ポンプがチャンバーに圧力を供給し、センサーでその圧力をモニターしながら、コントローラーが圧力を調整します。この一連のプロセスにより、細胞が体内のような静水圧環境で培養され、研究の目的に応じた生理的応答を引き出すことができます。

​静水圧圧縮刺激装置 メカノカルチャーTR

ハイスループット静水圧刺激

メカノカルチャーTR(MCTR)は、個々のウェル内の9検体に対して静水圧圧迫を行います。最大500kPaまでの圧力を装置にプログラムすることができます。透明な培養ウェルにより、正しい検体の装填を目視で確認でき、必要に応じて試験中にリアルタイムで画像化することも可能です。 検体チャンバープレートは滅菌可能で、実験室のインキュベーター内での長期細胞培養に適しています。

​静水圧流体圧縮刺激装置

静水圧圧縮

静水圧圧縮は、培養ウェルを培地で上まで満たすことで達成されます。上部のチャンバーを加圧すると、フレキシブルメンブレンが下方にたわみ、液面に押し付けられます。

​静水圧流体圧縮刺激・培養

主な特徴

  • 最大9ウェルまでの静水圧圧縮刺激

  • 0.5Hzで500kPaまでの圧力制御負荷

  • シンプル、周期的、断続的な刺激プロトコルを指定し、装置コントローラにアップロードするためのユーザーフレンドリーなインターフェースソフトウェア

刺激プロトコル

メカノカルチャーTRは、等速あるいは正弦波の圧縮パターンをプログラムすることができます。マグニチュード、周波数、休止時間、サイクルカウントはすべてソフトウェアアプリケーションで指定し、装置にプログラムすることができます。

​Preload, Stretch, Hold, Recover, Restの5フェーズで1サイクルとなり、それぞれのフェーズを秒単位で設定することが可能です。

刺激プロトコル

動画

実例紹介

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東北大学 大学院歯学研究科 分子・再生歯科補綴学分野  

山田将博先生にMCTRを使用頂いております。

機械的負荷による細胞間クロストークによる骨のターンオーバー活性と方向づけの研究の論文では、咀嚼負荷を再現するため、培養7日目のMLO-Y4細胞に対して最大49時間の周期的負荷に、CellScale社のMCTRが使用されました。

メカノカルチャーシリーズ 使用論文一覧

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